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Technical Service技术服务

发布日期:2025/3/13 10:43:00

细胞敲低服务是一种用于研究基因功能的技术,通过抑制特定基因的表达来观察其对细胞行为和生物学过程的影响。这种服务通常涉及将shRNA(短发夹RNA)导入细胞中,shRNA能够特异性地结合并降解目标mRNA,从而减少或阻止目标蛋白的产生。建立敲低细胞系的步骤包括:

1.设计shRNA序列:针对目标基因设计shRNA序列,确保其特异性和效率。

2.构建表达载体:将shRNA序列插入到含有抗性基因的表达载体中,常用的抗性基因包括新霉素、杀稻瘟菌素和嘌呤霉素。

3.转染细胞:使用病毒(如慢病毒或腺相关病毒)或非病毒方法将表达载体转染到目标细胞系中。

4.筛选稳定转化细胞:通过抗性筛选,如新霉素筛选,去除未转化的细胞,保留成功整合外源基因的细胞。

5.确认敲低效果:利用荧光检测或其他方法验证目标基因的表达水平是否显著降低。

6.稳定细胞系的扩增和维持:通过连续培养和传代,确保敲低效果在细胞系中长期稳定。

7.功能验证:对敲低细胞进行功能实验,如增殖、分化、凋亡等,以评估目标基因的生物学功能。 细胞敲低服务提供多种选项,如单基因或多基因敲低、短基因或长基因、单克隆或混合克隆,以及使用客户提供的细胞株。此外,服务还包括质粒设计、载体构建、病毒包装和表达分析等全流程支持。这类服务有助于深入理解基因功能,是现代生物学研究的重要工具。

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