在悬浮细胞的分离过程中,使用PBS(磷酸盐缓冲液)进行清洗是一个常见的步骤。分离悬浮细胞时使用PBS(磷酸盐缓冲液)清洗主要是因为PBS能够PBS可以提供一个中性的缓冲环境,维持细胞的渗透压平衡,同时具有良好的缓冲能力,可以保护细胞免受pH变化的影响。它不含有钙离子和镁离子,有助于避免细胞粘连,便于细胞分散和后续的分离过程。
具体原因包括:
1. 等渗性:PBS的渗透压与哺乳动物细胞的内环境相匹配,不会引起细胞的脱水或过度吸水,从而保护细胞的完整性和活性。
2. pH缓冲能力:PBS具有良好的pH缓冲能力,能够在较宽的pH范围内维持稳定的酸碱平衡,这有助于维持细胞的生理状态,尤其是在细胞分离和处理过程中避免pH波动对细胞造成损害。
3. 离子平衡:PBS含有NaCl、KCl、Na2HPO4和KH2PO4,这些成分能够提供细胞所需的离子环境,保持细胞膜的正常功能和结构。
4. 避免机械损伤:在细胞分离过程中,低速离心和PBS清洗可以减少因高速离心或使用其他溶液(如生理盐水)可能造成的细胞损伤。
5. 细胞活性维持:DPBS(杜氏磷酸盐缓冲液),一种不含Ca2+和Mg2+的PBS,特别适用于细胞的短期维持,因为它能更好地避免细胞聚集,维持细胞的渗透压平衡,保持pH稳定,为细胞和组织提供一个相对稳定的离子环境。
综上所述,PBS及其衍生形式DPBS是分离悬浮细胞时的首选缓冲液,因其能有效保护细胞,维持细胞生理状态,减少机械损伤,确保细胞的活性和完整性。