SV40大T抗原（Simian virus 40 Large T Antigen）是猴空泡病毒40（SV40）的一种重要蛋白质，由SV40基因组中的大T抗原基因编码。这种抗原具有多种生物学功能，主要与细胞增殖和永生化有关。SV40大T抗原在细胞生物学研究中被广泛用于构建永生化细胞系，以及研究细胞增殖、衰老和癌症发生机制。

SV40大T抗原（SV40 Large T Antigen, SV40T）通过特定机制使细胞永生化，主要涉及以下步骤：

1、抑制抑癌蛋白功能

‌大T抗原‌：与p53和Rb蛋白结合，阻断p53介导的细胞周期检查点（如G1/S阻滞）和凋亡通路，同时释放E2F转录因子促进S期基因表达‌。

‌小T抗原‌：增强大T抗原的转化效率，但非必需‌。

2、抑制细胞周期检查点：

SV40T与细胞内的p53和pRb（视网膜母细胞瘤蛋白）结合，这两个蛋白是细胞周期的关键调控因子。

p53被称为“基因组守护者”，负责响应DNA损伤并触发细胞周期停滞或凋亡。

pRb则作为细胞进入S期（DNA合成期）的“刹车”，在非磷酸化状态下与E2F转录因子结合，抑制其活性。

3、细胞表型改变‌

转化细胞突破海弗利克极限（有限分裂次数），获得无限增殖能力‌。

4、外源基因导入‌

通过重组腺病毒、慢病毒载体将SV40大T抗原基因整合至宿主细胞基因组，实现持续表达。

5、p53失活：

SV40T直接与p53蛋白结合，改变其构象，使其无法作为有效的转录因子。

这导致细胞对DNA损伤的响应能力丧失或减弱，无法启动由端粒缩短或损伤触发的衰老或凋亡程序。

细胞因此能够无视警告信号，继续分裂。‌

6、突破Hayflick极限：

通过上述机制，SV40T使细胞能够持续分裂超过Hayflick极限（通常为50-60次分裂），达到无限传代或极长时间传代的能力。

SV40 T抗原不仅是实验室构建永生化细胞系的常用工具，还为研究细胞增殖调控、肿瘤发生机制提供了模型。这种永生化方法广泛应用于多种细胞类型的研究，虽然SV40T可以有效实现细胞永生化，但可能伴随细胞表型的变化，且在长期培养中需监控其遗传稳定性，以确保实验结果的可靠性。‌