Vero细胞是一种非洲绿猴肾细胞系，最初由日本千叶大学的安村美博教授于1962年从正常成年非洲绿猴的肾脏上皮细胞分离获得。Vero细胞因其生长特性良好、培养条件简单、繁殖速度快，成为全球病毒疫苗生产中应用最广泛、最可靠的细胞系之一。判断Vero细胞是否需要传代通常基于以下标准：

一、细胞密度观察‌

Vero细胞在贴壁培养时，当细胞汇合度达到80%-90%时需传代。此时显微镜下可见细胞单层覆盖培养皿底部，但未完全融合（接触抑制前）。若细胞密度超过90%会导致生长停滞或状态下降。

二、‌生长状态评估

1、‌形态学特征‌：健康Vero细胞呈上皮样，边界清晰，胞质透明。若出现胞质颗粒增多、立体感消失或漂浮细胞（>5%）则提示需传代。

2、‌代谢指标‌：培养基pH值快速下降（>0.1-0.2单位）或乳酸积累（>3mmol/L）表明细胞代谢旺盛，需及时传代。

三、‌传代操作建议

1、‌消化时间‌：使用胰酶消化时，37℃下1-2分钟即可见细胞变圆、间隙增大，需立即终止消化。

2、‌传代比例‌：通常按1:2至1:3分装，每周传代2-3次。

四、关键注意事项

1、无菌操作：严格遵守无菌流程，避免交叉污染，胰酶消化时间需精确控制。

2、血清选择：优先使用低内毒素（≤3EU/ml）的特级胎牛血清（如Ausbian品牌），并通过试用确保批次稳定性。

五、总结与实践建议

1、动态监测：每日观察细胞形态、汇合度及培养基颜色，结合培养时间设定传代计划。

2、实验优化：若用于疫苗生产，可在72-96小时传代窗口期内，根据TCID50值选择最佳时间点。

3、批次管理：血清等试剂需锁定优质批次，避免频繁更换导致细胞状态波动。

  通过这些指标，可以判断Vero细胞是否需要传代，以确保细胞健康、生长良好，并满足实验或生产需求。‌