原代细胞培养是指直接从生物体（如动物或植物）的组织或器官中分离出细胞，并在实验室条件下进行的首次培养。

判断原代细胞培养是否成功通常需要关注以下几个关键指标：

一、贴壁状态‌：

成功培养的原代细胞应在24-48小时内贴壁，细胞伸展呈梭形、多角形或上皮样等典型形态，轮廓清晰但不过度收缩‌。若细胞漂浮或贴壁不良，需检查培养条件（如包被基质、血清浓度）或操作流程‌。

二、‌细胞活性‌：

活细胞占比应≥90%，镜下观察胞质均匀、无空泡或颗粒堆积，死细胞可通过台盼蓝染色排除。

三、生长速率：

原代细胞应显示出一定的增殖能力，这可以通过定期观察细胞数量的增加来评估。健康生长的细胞群体通常在几天内会覆盖培养基底的一定比例。

四、培养液颜色和透明度：

正常的培养液应保持清澈，若培养液变黄或有浑浊，可能是由于细胞代谢产物积累或污染。但需要注意，某些原代细胞培养初期可能会出现培养液变黄，这是正常的细胞生长反应。

五、‌传代能力‌：

成功培养的原代细胞可传代至10代以内，且保持原有组织特性（如肿瘤细胞需具备锚着非依赖性生长）。

六、特异性标记‌：

通过免疫荧光或流式细胞术检测组织特异性标志物（如上皮细胞角蛋白、间充质干细胞表面抗原）。

七、‌污染排查‌：

定期检测支原体、细菌等污染，培养液浑浊或pH异常（如快速变黄）可能提示污染失败。

八、生存时间和增殖代数：

根据实验目的，原代细胞培养的成功还可能包括细胞的生存时间（在体外维持生长的时间）和增殖代数（细胞能够传代的次数）。

通过综合这些指标，可以判断原代细胞培养是否成功，并根据需要调整培养条件以优化细胞生长和存活。