降低细胞培养污染率是确保实验成功的关键。通过优化操作流程、加强环境控制和规范人员培训，可以显著减少污染风险。以下是一些经过验证的有效方法：

一、规范操作流程

超净台使用‌：操作前30分钟开启紫外灯消杀，风机启动后等待5分钟让气流稳定，手臂沿工作台边缘平移以减少气流扰动。

个人防护‌：穿戴长袖白大褂、高领口罩和无粉手套，操作不同细胞株时更换手套或酒精消毒。

培养基管理‌：现配现用，4℃储存不超过3天；分装时留出1/5空间防止液体溢出。

二、环境与设备控制

培养箱维护‌：定期用三氧机或紫外光消毒，水盘使用三蒸水，并添加硫酸铜预防霉菌污染。

实验室清洁‌：每周用84液、清水、酒精依次擦拭培养箱，并紫外照射。

三、人员培训与意识提升

“1+2”培训模式‌：结合线上培训与导师制+实验室制实践，可提升研究生理论知识和操作规范性，减少错误行为。

定期考核‌：通过理论考试和实践操作评估，强化无菌操作意识。

四、污染应急处理

细菌污染‌：立即丢弃污染细胞，珍贵细胞可用含双抗的PBS冲洗后加入庆大霉素处理。

真菌污染‌：不建议挽救，需彻底消毒环境（如过氧乙酸擦洗培养箱）。

支原体检测‌：定期使用试剂盒筛查，发现污染后用泰乐菌素处理。

通过以上措施，血培养标本污染率可从4.78%降至1.79%，尿培养污染率从26.10%降至4.78%。核心在于严格执行标准化操作、定期维护设备并持续培训人员。‌