在细胞培养实验中，污染是指外来微生物（如细菌、真菌、支原体、病毒）或异种细胞（交叉污染）侵入培养体系。这些污染物会与目标细胞竞争资源、改变微环境或直接干扰细胞生理功能，从而引入不可控变量，使实验结果失真。
主要污染类型及其对实验结果的具体影响
不同类型的污染对实验的影响程度和机制各不相同。其中，支原体污染、病毒污染和细胞交叉污染被认为是最具破坏性的组合，因为它们难以检测且能深度干扰细胞的基因表达和生物学行为。
以下表格总结了常见污染类型的关键特征及其对实验结果的影响：
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污染类型 |
是否易察觉 |
对细胞/实验的主要影响 |
典型后果 |
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细菌污染 |
是（常致培养基浑浊、pH下降） |
消耗营养、产生毒素、改变pH |
细胞生长抑制、形态异常、死亡；MTT等代谢实验出现假阳性 |
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真菌/霉菌污染 |
是（可见菌丝或漂浮物） |
争夺营养、释放有毒代谢物 |
细胞活力下降、增殖减慢、死亡 |
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支原体污染 |
否（无明显浑浊，常规镜检难见） |
抑制细胞生长、诱导染色体畸变、改变基因表达 |
实验数据波动大、结果不可重复、测序结果受影响 |
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病毒污染 |
否（通常无外观变化） |
整合宿主基因组、干扰复制与表达 |
转染实验结果异常、长期影响细胞稳定性 |
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细胞交叉污染 |
否（细胞形态可能正常） |
目标细胞被其他细胞系取代（如HeLa污染） |
实验基于错误细胞进行，结论完全错误，发表论文无效 |
支原体因体积小（0.1–0.3 µm），可穿透常规滤膜，且无细胞壁，能紧密结合宿主细胞膜，长期共存而不引起明显病变，因此极具隐蔽性和危害性。而细胞交叉污染问题广泛存在，据估计约15–30%的实验室使用了被污染或错误识别的细胞系，这可能导致多年研究付诸东流。
总结：
细胞污染不仅会导致细胞死亡或生长异常等直观问题，更深层次的风险在于它会系统性地扭曲实验数据，造成假阳性、结果不可重复、甚至基于错误细胞得出完全误导性的科学结论。尤其是支原体污染和细胞交叉污染，因其隐匿性强，危害尤为严重。
为确保科研质量，必须在关键节点进行检测：
l 新细胞系引入时；
l 冻存前或长期传代后；
l 实验前后及投稿前；
l 使用多种细胞系时定期排查交叉污染。
