用酶或机械方法直接从人或动物组织中分离出来的细胞。严格来说，从机体分离出来到传代之前的细胞称为原代细胞，绝大部分的原代细胞在体外可以分裂10-15次(这与细胞的端粒长短有关)，再加上取材，成本等因素，通常会把培养的第一代到第十代以内的细胞统称为原代细胞。

       原代细胞可用来转染siRNA、antisense RNA、microRNA 等 200bp 以内的小分子 RNA 和 DNA，可转染绝大多数原代细胞。目前，无论国外还是国内，原代细胞的核酸转染都是个热点难题，市场还缺乏真正有效的商品化的原代细胞核酸转染试剂。原代细胞能够高效转染绝大多数原代细胞，获得比较理想的基因敲除效果。甚至对一些活体寄生虫幼虫，也能获得较为理想的转染结果。对于大多数原代细胞，RFect PM 细胞转染阳性率都在80%以上，而转染细胞死亡率不到 10%。

原代细胞分离和培养基本步骤：

1、器官和组织的选择

尽可能的去除不必要的组织和血迹。
2、原代细胞的分离

（1）应用PriCells原代细胞分离试剂盒I、II、III。

（2）根据组织来源不同，可选用不同的PriCells原代细胞分离试剂盒。
3、原代细胞的培养：

（1）PriCells原代细胞特制培养基

（2）PriCells原代细胞特制添加物

（3）优质胎牛血清
4、细胞的培养和鉴定：

PriCells原代细胞鉴定试剂盒
5、原代细胞的传代、保存

（1）传代：依椐细胞的生长状态，生长的细胞1：2或1：3进行传代。

（2）保存：DMSO＋培养液＋血清

按下列顺序降温：室温→4℃（20分钟）→冰箱冷冻室（30分钟）→超低温冰箱（－80℃过夜）→液氮。
6、原代细胞的复苏

（1）取出细胞，迅速放入37℃温水中快速解冻。

（2）吸出细胞悬液，并加10倍以上培养液。

（3）用培养液适当稀释后接种培养瓶，放入37℃CO2培养箱静置培养。