Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。
QRT-PCR,是 Quantitative Real-time PCR 的简称,也叫实时荧光定量PCR,是一种在 DNA 扩增反应中,以荧光化学物质测定每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物的总量通过内参或者外参法对待测样品中特定DNA序列进行定量分析的方法。
是一种检测蛋白质和DNA序列相互结合的技术,可用于定性和定量分析。
双分子荧光互补(Bimolecular Fluorescent Complimentary, BiFC)技术是指通过具有相互作用亲和力的两个蛋白质,将分别与其相连的荧光蛋白片段拉近,组装成完整的荧光蛋白,从而表征蛋白质相互作用的发生及其空间位置。
染色质免疫沉淀技术(ChIP)是一种在检测与特异性蛋白质结合的DNA片段,以探究特异性蛋白质与DNA相互作用的技术,通常用于研究转录因子与基因启动子结合位点或组蛋白特异性修饰位点。
GST pull-down是体外研究蛋白与蛋白互作的有力工具。该技术将GST标签融合表达的诱饵蛋白,特异性结合谷胱甘肽亲和凝胶或磁珠,而后与细胞裂解液共孵育,纯化出与GST融合表达的诱饵蛋白,通过洗涤、洗脱得到的蛋白产物,利用western-blot检测特定蛋白是否与猎物蛋白结合;或通过质谱鉴定筛选出与诱饵蛋白可能互作的蛋白信息。
Co-IP技术,是用于检测蛋白质相互作用的一种方法。该实验基于免疫学原理,利用与目标蛋白质特异性结合的抗体对其进行识别和富集。当目标蛋白质和其配体或互作伴侣结合在一起时,进一步通过洗涤、洗脱和分析等步骤,以便完全确定目标蛋白质和其互作伴侣的身份和相互作用模式。
Co-IP实验是一种常用的蛋白质分析方法,在生物医学和基础研究中具有广泛应用价值。该方法可以用于研究蛋白质相互作用及其互作位点、信号转导途径、细胞周期、疾病机制、病原及药物靶点等方面的问题。